Papel del enzima óxido nítrico sintasa endotelial en la patogenia de la poliposis nasosinusal
- Escobar Sanz-Dranguet, Paloma
- Francisco J. Márquez Zuzendaria
Defentsa unibertsitatea: Universidad Autónoma de Madrid
Fecha de defensa: 2004(e)ko apirila-(a)k 26
- José Antonio Rodríguez Montes Presidentea
- Javier Gauran Bouzas Idazkaria
- Ricardo José Bosch Martínez Kidea
- Mercedes Ruiz Moreno Kidea
- Jesús de la Osada García Kidea
Mota: Tesia
Laburpena
El estudio se ha realizado en dos grupos, un brazo estaba constituido por 15 pacientes diagnosticados de poliposis nasosinusal, y el otro por un grupo control de 11 pacientes que iban a ser intervenidos de septoplastia. El estudio estadístico se realizó mediante el programa SPSS para Windows, utilizando pruebas no paramétricas. 1,- Se analizaron mediante Western blot los niveles de expresión de proteína NOSe en 8 pacientes y 6 controles, demostrando la presencia de una banda de 140 kDa en las muestras de mucosas nasal sana y de pólipos nasales, lo que indica la expresión de la proteína NOSe en estos tejidos. El densitometrado de NOSe mostró un valor medio de 3.53 en los controles y 12.03 en los pacientes (medición en unidades arbitrarias). Esta diferencia fue estadísticamente significativa (p menor 0,01). 2,- La localización de la expresión de eNOS e iNOS se estudió con técnicas de inmunohistoquímica medainte anticuerpos policlonales anti eNOS y anti iNOs, encontrando que la proteína NOSe se localiza en el endotelio, tanto en mucosa normal, como en pólipos, con mayor intensidad en estos últimos. La NOSi se localiza en el epitelio, con una tinción muy débil en la mucosa normal, y muy intensa en los pólipos. 3,- Se prepararon extractos citiplasmáticos de las biopsias de 8 pacientes y 6 controles. Los lisados citoplásmicos se incubaron con UNA sonda UTR-L marcada procedente del ARNm de NOSe. Posteriormente se realizó una electroforesis para detectar los complejos formados por la unión ARNm-proteína. La adición de una sonda marcada (UTR-L) a extractos citoplasmáticos de tejido nasal, resulta en un cambio en la movilidad de las bandas del gel, formando una banda de 60 KD, con una intensidad mucho mayor en las muestras obtenidas de mucosa nasal de los controles que en las obtenidas de pólipos de los pacientes. Al realizar el análisis del densitometrado los valores encontrados en los pólipos eran práctic