PROCEDIMIENTO DE MODIFICACION NUCLEOFILICA DE PROTEINAS Y SU APLICACION A LA INMOVILIZACION DE LAS MISMAS.
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Inventors:
- María Elena Domínguez Cañas
- SUAREZ, GUILLAUME
- Aránzazu Narváez García
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Universidad de Alcalá
info
Universidad de Alcalá
Alcalá de Henares, España
ES2242456A1 (01-11-2005)
ES2242456B1 (01-03-2007)
P200001965 (02-08-2000)
Abstract
Procedimiento de modificación nucleofilica de proteínas y su aplicación a la inmovilización de las mismas.
El objeto de la invención es desarrollar un procedimiento de modificación de proteínas y su aplicación a la inmovilización de las mismas. El procedimiento consiste en la reacción química entre los grupos nucleofílicos libres de los residuos proteínicos y un derivado halogenado permite, a su vez el controlar las características de la proteína, tales como su carga neta e hidrofobicidad. El procedimiento descrito para la modificación de la carga neta de las proteínas resulta en un punto isoeléctrico independiente del pH. En el caso de oxidorreductasas, este procedimiento permite el control de la constante de transferencia de electrones tanto mediada como directa. Este procedimiento permite la incorporación de grupos negativos, positivos, hidrofobóbicos, hirofílicos o con cualquier funcionalidad preservando su actividad enzimática hasta un 80% o su constante de afinidad en el caso de anticuerpos. La modificación de la carga neta de las proteínas permite su deposición e inmovilización controlada mediante la obtención de estructuras supramoleculares a través de interacciones electrostáticas y que resulten en dispositivos con fines analíticos y/o sintéticos. El procedimiento de inmovilización se basa en la formación de bicapas a través de técnicas Langmuir-Blodgett o por fusión de vesículas. El procedimiento de modificación aquí descrito y su aplicación a la inmovilización de proteínas permite la construcción de biosensores enzimáticos e inmunosensores, así como sensores de DNA mediante el uso de estas enzimas modificadas como marcadores.