Modulación mediante precondicionamiento isquémico de la respuesta inflamatoria y apoptótica inducida por isquemia-reperfusión en un modelo experimental porcino de autotrasplante pulmonar

Resumen

INTRODUCCIÓN: En diversas situaciones clínicas y quirúrgicas, el pulmón se ve sometido a períodos de isquemia más o menos prolongados con el consiguiente riesgo de producirse un síndrome de isquemia-reperfusión (SIR), que implica una compleja reacción inflamatoria que puede producir edema pulmonar grave y disfunción pulmonar. El precondicionamiento isquémico (PCI) es un método por el cual se somete a un órgano a uno o varios períodos breves de isquemia, previo a una agresión isquémica mayor, con el fin de reducir la extensión del daño por isquemia-reperfusión (IR). Nos planteamos que el PCI sobre el pulmón podría ejercer un efecto protector precoz sobre SIR, y que ésta protección puede ponerse de manifiesto en el tejido pulmonar mediante técnicas histológicas e inmunohistoquímicas. MATERIAL Y MÉTODOS: Se diseñó un modelo de autotrasplante pulmonar en cerdo para el estudio del SIR. Se realizaron 16 procedimientos quirúrgicos divididos en 3 grupos: grupo control (CON), grupo de precondicionamiento isquémico (PCI) y grupo de cirugía simulada (SHAM). El protocolo quirúrgico consiste en la realización de una neumonectomía izquierda, lobectomía craneal ex-situ, reimplantación del lóbulo caudal y reperfusión durante 30 minutos. En el grupo PCI, antes de finalizar la neumonectomía, se realiza oclusión de la arteria pulmonar izquierda durante dos períodos de 5 minutos, intercalando 5 minutos de reperfusión entre ellos. Al grupo SHAM, se le realizó exclusivamente una toracotomía. Se realizan determinaciones gasométricas arteriales, hemodinámicas y biopsias de tejido pulmonar a los 30 minutos de la reperfusión. Se realizó un análisis histológico del daño pulmonar (mediante tinción con hematoxilina-eosina) y análisis de expresión inmunohistoquímica de CD68 (para identificar la implicación de células de estirpe monocito-macrófago), proteína quimiotáctica de monocitos-1 (MCP-1) y proteínas relacionadas con la apoptosis como son la caspasa-9 y la proteína Bcl-2. RESULTADOS: No se encuentran diferencias destacables de las variables gasométricas y hemodinámica entre grupos. La IR produjo en el tejido pulmonar una reacción inflamatoria, con predominio de células macrofágicas. En el grupo PCI se observa una menor inflamación e infiltrado por macrófagos. Tras la IR observamos un aumento de expresión de células CD68 en los alveolos, y en el grupo PCI, aunque también aumentan, lo hacen en menor medida que en el grupo control. La IR produjo en el tejido pulmonar un aumento de expresión de MCP-1 (mediador responsable de la quimiotaxis de monocitos y macrofágos), pero al aplicar PCI, disminuye su expresión. La IR indujo en los pulmones un aumento de la caspasa-9 (proapoptótica) y en el grupo PCI disminuye la caspasa-9 con respecto al grupo control. El PCI indujo un aumento de expresión de la proteína antiapoptótica Bcl-2 en las células pulmonares, con respecto al grupo sometido a IR. CONCLUSIONES: En nuestro modelo, se demuestra que el PCI ejerce una la modulación de la fase temprana del SIR pulmonar, que se manifiesta en los tejidos a los 30 minutos de la reperfusión, tanto en el análisis histológico como mediante técnicas inmunohistoquímicas, mostrando una disminución de la inflamación y la apoptosis en los animales precondicionados.