Estudios celular y molecular del complejo escrt-iii en aspergillus nidulans y su relación con la señalización de ph ambiental

Resum

Los hongos filamentosos son capaces de crecer en un amplio rango de pH ambiental. La adaptación a distintos pH implica la regulación y expresión de aquellos genes que le permitan crecer de forma óptima en las nuevas condiciones ambientales. En Aspergillus nidulans la regulación por pH está mediada por el factor de transcripción con dedos de zinc PacC. El producto primario de la traducción, PacC72, permanece inactivo a pH ácido. A pH neutro o alcalino se produce la activación de la ruta pal (com puesta por el producto de los genes palA, palB, palC, palF, palH y palI) de transducción de señal, causando la activación proteolítica de PacC72. La activación requiere dos sucesos de proteólisis. El primer corte proteolítico, dependiente de pH, ti ene lugar en una región conservada denominada "signalling protease box". Se escinden 180 residuos desde el extremo carboxilo terminal de la proteína dando lugar a la forma PacC53. Es posible que esta proteasa "señalizadora" sea PalB. A continuación, en una reacción independiente de pH ambiental, la proteasa "procesativa" convierte a PacC53 en PacC27. Las 6 proteínas de la ruta pal se dividen actualmente en dos complejos separados espacialmente en la célula. Un complejo ¿superior¿ de señalización por pH de la membrana plasmática y otro complejo "inferior" de señalización del endosoma prevacuolar. El complejo "superior" está formado por las proteínas PalF, PalH y PalI. El complejo "inferior" está formado por las proteínas PalA, PalC y como se demuestra en esta tesis PalB. PalA interacciona con Vsp32/Sfn7, un componente del complejo ESCRT-III (Endosomal Sorting Complex Required for Transport), y con PacC72. PalB es una cisteín-proteasa de la familia de las calpaínas. A diferencia de su or tólogo en levaduras Rim13, PalB presenta un dominio MIT "microtubule interacting and trafficking" en su extremo amino terminal. El dominio MIT también está presente en la AAA-ATPasa Vps4, componente periférico del ESCRT-III. En Saccharomyces cerevisi ae, Vps4 interacciona a través de su dominio MIT con Vps46/Did2 una de las proteínas de la familia Snf7. En A. nidulans PalB interacciona con Vps24, componente del complejo ESCRT-III, a través del dominio MIT de PalB y en motivo MIM (MIT interacting motiv) de Vps24, dicha interacción es específica y directa. La interacción de PalB con Vps24 es responsable, al menos en parte, de la localización subcelular de PalB. La asociación de PalB a las membranas endosomales parece ser necesario para el...