Estudio de los efectos del tamoxifeno, raloxifeno y toremifeno sobre la regulación de la homeostasis del colesterolimpacto sobre el transporte reverso de colesterol desde los macrófagos

Resumen

Los moduladores selectivos de los receptores de estrógenos (SERM) constituyen un grupo diverso de compuestos con actividad agonista o antagonista de estrógenos. En relación con estas acciones, el tamoxifeno, el toremifeno y el raloxifeno han acaparado gran interés clínico para el tratamiento de diversas patologías. Sin embargo, se conoce que estos fármacos poseen, además, un efecto hipocolesterolemiante, ya que reducen la concentración de LDL. En el caso del TAM se conoce que estimula la expresión del receptor de LDL y que este efecto es sinérgico con el de la lovastatina. Con estos antecedentes, nos propusimos estudiar los efectos del tamoxifeno, raloxifeno y toremifeno sobre diversos aspectos de la regulación de la homeostasis del colesterol y, especialmente, el impacto sobre el transporte reverso de colesterol desde los macrófagos. Comenzamos nuestro estudio con un barrido de expresión génica mediante microarrays en células MOLT-4 y HepG2 tratadas con cada uno de los SERM y en combinación o no con lovastatina. Observamos que los tres SERM aumentaron la expresión de los genes diana de las proteínas que se unen a los elementos regulados por esteroles (SREBP), efecto que fue, además, sinérgico cuando cada uno de estos fármacos se combinó con la lovastatina. En consonancia con ello, los SERM aumentaron el procesamiento de SREBP-2. Comprobamos también en distintos modelos celulares que, al igual que se había descrito para el tamoxifeno en células MOLT-4, el raloxifeno y el toremifeno inhibían el tráfico intracelular del colesterol suministrado con LDL o, en el caso de los macrófagos, LDL acetiladas, produciendo un fenotipo compatible con la acumulación de colesterol libre en los endosomas tardíos/lisosomas. Esta inhibición del tráfico podía explicar el aumento del procesamiento de SREBP y la expresión de sus genes diana. Por otro lado, los SERM disminuyeron la expresión de genes diana de LXR, especialmente la de ABCA1 y ABCG1. De manera compatible con los efectos celulares de los SERM, estos inhibieron la exportación de [3H]colesterol de los macrófagos tanto humanos como de ratón hacia la apolipoproteína A-I y, más levemente, hacia las HDL. En un modelo de ratón, el tratamiento oral con raloxifeno y, en mayor medida, con tamoxifeno disminuyeron la concentración de colesterol-HDL y alteraron la composición de estas partículas. Esto se asoció a sendos aumentos en el catabolismo de HDL-oleato de [3H]colesterol y de la expresión hepática del receptor SR-BI. Además, dichos SERM disminuyeron la capacidad de las HDL para promover la exportación de [3H]colesterol por los macrófagos. Finalmente, analizamos el efecto del tratamiento con estos SERM sobre el transporte reverso de colesterol desde macrófagos cargados con [3H]colesterol e inyectados intraperitonealmente. El tamoxifeno, pero no el raloxifeno, disminuyó las cantidades de trazador en el suero, hígado y heces. Ambos fármacos, aunque en mayor medida el tamoxifeno, redujeron la expresión hepática de ABCG5 y ABCG8. Podemos concluir que, mediante la inhibición del tráfico intracelular de colesterol, el tamoxifeno, raloxifeno y toremifeno interfieren en los mecanismos reguladores de la homeostasis celular del colesterol. Más particularmente, los SERM reducen la exportación de colesterol por los macrófagos, especialmente la mediada por ABCA1. In vivo, el tamoxifeno y el raloxifeno reducen la concentración de colesterol-HDL en ratones mediante la aceleración de su catabolismo, a la vez que alteran la composición y funcionalidad de las HDL. Sin embargo, el tamoxifeno, pero no el raloxifeno, disminuye el transporte reverso de colesterol desde los macrófagos, efecto probablemente debido a la inhibición de la salida del colesterol desde dichas células y, en menor grado, a la reducción de la excreción hepática mediada por ABCG5 y ABCG.