Señales proangiogénicas en el proceso cicatricialpapel del péptido de la proadrenomedulina en la cicatrización de úlceras de etiología vascular

Resum

Hay importantes avances en el campo de la Ingeniería Tisular en relación con la reparación de úlceras vasculares. En este sentido, el péptido N-terminal de 20 aminoácidos de la proadrenomedulina (PAMP) tiene reconocida capacidad proangiogénica y efectos beneficiosos en cicatrización comprometida. En esta Tesis, se planteó que el PAMP puede ejercer un importante papel terapéutico en la cicatrización de úlceras de etiología vascular. Los objetivos fueron: uso de un nuevo apósito bicapa, biodegradable y biofuncionalizado, conteniendo bemiparina (que puede potenciar el efecto del PAMP) y PAMP para facilitar la curación de heridas; valoración de su eficacia en un modelo in vivo de cicatrización de heridas en condiciones normales (oreja de conejo en situación de normoxia) o comprometida por isquemia experimental: respuesta inflamatoria, neoformación y maduración tisular. Se realizó un defecto excisional en la oreja y se aplicó el apósito durante 14 días. Se consideraron 4 grupos: control, polímero, bemiparina y bemiparina más PAMP (normoxia o isquemia). Se evaluó la respuesta inflamatoria, formación de nuevo tejido y maduración tisular mediante análisis morfométricos, histológicos e inmunohistológicos. Tras 14 días, la inflamación tisular había disminuido respecto a los primeros días y el tejido neoformado había comenzado su maduración. En animales normóxicos e isquémicos, el grupo que presentó una menor presencia de macrófagos fue el tratado con discos que contenían bemiparina y PAMP. El PAMP favoreció un aumento de la angiogénesis. Los niveles de -actina fueron especialmente elevados en conejos no isquémicos tratados con bemiparina y en isquémicos tratados con bemiparina y PAMP. Los porcentajes de cierre del defecto tras 14 días de su formación en la oreja de conejo normóxico o isquémico fueron similares en todos los grupos. Sin embargo, los discos cargados con bemiparina y PAMP causaron menos contracción y mayor reepitelización de la lesión, especialmente en condiciones de isquemia; parece que el PAMP favorece la formación de tejido de granulación y el enriquecimiento de miofibroblastos que contribuyen a la contracción del área lesionada y facilita la reepitelización de la herida; la amplia colección de imágenes histológicas con diferentes tinciones apoya la buena reepitelización del defecto con apósitos conteniendo bemiparina y PAMP, especialmente en condiciones de isquemia, mostrando una correcta calidad biológica de la reparación del defecto. En definitiva, se aprecia claramente una fase de remodelación en las lesiones tratadas con bemiparina y PAMP, mientras que las no tratadas permanecen en una situación inflamatoria/proliferativa. El grupo de bemiparina en los animales normóxicos presentó una epidermis regenerada más delgada que los isquémicos. La regeneración fue mucho mayor en los conejos normoxigenados que en los isquémicos, reduciendo la contracción de forma significativa y apenas apreciándose diferencia en el grosor de la epidermis en la zona sana y la dañada. Los resultados obtenidos confirman la hipótesis y apoyan las siguientes conclusiones: 1) La aplicación de un apósito bicapa, biodegradable, bioabsorbible y biofuncionalizado, formado por una capa externa de poliuretano segmentado cargada con nanopartículas conteniendo bemiparina y una capa interna de hidrogel de gelatina-hialuronato entrecruzado con genipina cargada con PAMP es una buena herramienta dentro del campo de la Ingeniería tisular para aplicar por vía tópica de manera controlada biomoléculas que mejoran el proceso de cicatrización de heridas. 2) El modelo de la oreja de conejo utilizado para estudiar la reparación del defecto en situación normal (normoxia) o comprometida (isquemia) con aplicación del apósito bicapa permite resaltar la utilidad del sistema polimérico en el proceso de reparación, especialmente con el doble contenido +bemiparina/+PAMP y tanto en situación de normoxia como, especialmente, de isquemia.