Estudio fitoquímico y farmacológico de Anogeissus leiocarpus, Fadogia agrestis y Phillyrea latifolia. Plantas utilizadas en medicina tradicional

Laburpena

Esta tesis se inscribe en el marco de la etnofarmacología, estudiando a nivel químico y farmacológico, las plantas utilizadas en medicina tradicional como antimaláricas y consta de dos partes: - Parte fitoquímica donde se presenta una síntesis bibliografía de los trabajos previos sobre la familia y el genero de las tres plantas seleccionadas y el estudio fitoquímico de cada una de ellas. - Parte farmacológica donde se presenta una síntesis bibliográfica de las plantas utilizadas en medicina tradicional como antipalúdicas, así como una revisión sobre el paludismo, la leishmaniosis, las micosis y la genotoxicidad al igual que el estudio farmacológico, a estos niveles, de los extractos y de ciertos productos aislados. Los objetivos de este trabajo son: - Validar la utilización de estas plantas en medicina tradicional mediante estudios fitoquímicos y farmacológicos que permitan evidenciar su posible actividad antiplasmodial e identificar las moléculas responsables de la misma. - Elegir la planta mas adaptada en función de su actividad y de su inocuidad cara a su posible desarrollo en terapéutica en el hombre. Para ello, distintas técnicas de extracción han permitido obtener diferentes extractos brutos. La purificación y el aislamiento de los principios activos han sido efectuados mediante técnicas cromatográficas. La elucidación estructural ha sido hecha por métodos químicos y espectroscópicos. En los estudios farmacológicos, se ha evaluado la actividad antiplasmodial "in vitro" de los extractos brutos así como de los compuestos puros, además de la evaluación de la posible toxicidad "in vitro" de los extractos y de los compuestos puros que han presentado una actividad antiplasmodial significativa. La puesta en evidencia de la actividad antiplasmodial ha sido realizada mediante un ensayo "in vitro" en una cepa resistente (w2) de Plasmodium falciparum. La puesta en evidencia de la toxicidad de los extractos activos en el Plasmodium "in vitro " ha sido efectuada en los macrófagos de ratón y en los cultivos de células THIP1. La evaluación de la genotoxicidad ha sido realizada mediante dos métodos diferentes: un ensayo de mutación génica en bacterias (test d"Ames) y un ensayo de aberración cromosómica "in vitro"en linfocitos humanos. En el extracto hidroalcohólico 80% de las hojas de Fadogia agrestis Scweinf ex. Hiern se han aislado e identificado 11 compuestos descritos por primera vez en la planta de los cuales 5 son flavonoides: (Isoquercitrina, Rutin, Astragalina, Quercitrina, Quercetina) un ácido fenólico (Ácido Clorogénico) y 6 nuevos compuestos monoterpénicos (Inresanturosido I, Inresanturosido II, Inresanturosido III, Inresanturosido IV, Inresanturosido V y Inresanturosido VI) inéditos en la naturaleza y que describimos por primera vez en esta memoria. En el extracto hidroalcohólico 80% de las hojas de Phillyrea lantifolia L. , se ha identificado un derivado fenil propanoico, La Siringian y el secoiridoide Oleuropeosido. Se ha realizado un estudio analítico por HPLC para la caracterización de los componentes del extracto activo MeOH 50% de Phillyrea latifolia. Se identificaron 3 flavonoides: Apegenina-7-Glucosido, Luteolin-7-Glucosido y Rutina, un derivado fenil propanoico: EL Verbascosido y el secoiridoide Oleuropeosido. Se ha realizado un estudio cuantitativo por HPLC del oleuropeósido a partir del extracto hidroalcohólico 60% de las hojas de Phillyrea latifolia, siendo su contenido medio en las hojas de 13,4% La actividad antiplasmodial del oleuropeósido (CI50=440ng/ml) es próxima a la de la cloroquina (CI50=360+- 45ng/ml) siendo ligeramente menos activo. Este compuesto es uno de los responsables de la actividad antiplasmodial del extracto hidroalcohólico de las hojas de P. Latifolia. Además el oleuropeósido posee una baja toxicidad celular global ya que su índice de selectividad es elevado (IS=163.6) mostrando así una actividad especifica.