Efecto del contenido de colesterol y disponibilidad de mevalonato sobre la expresión de proteinas G

Résumé

Para ver los efectos de las variaciones en el contenido de colesterol celular y mevalonato sobre la expresión de la proteína Ras y diméro Betagamma en células GH4C1, incubamos estas células por diferentes períodos de tiempo en suero libre de lipoproteínas, LPDS (situación de alta síntesis de mevalonato), LPDS suplementado con 25 HC y colesterol (baja síntesis de mevalonato) con y sin mevalonato, y determinamos la cantidad de ras en la fracción en membranas o en el homogenado total. La presencia de mevalonato es requerido imprescindible para que Ras se procese y se ancle a la membrana plasmática. De hecho, el aumento del mevalonato produjo un aumento de la localización de Ras en la membrana y su disminución la redujo. Este efecto parece estar relacionado con la disponibilidad de restos farnesilos. Además del conocido papel del mevalonato en el anclaje Ras en la membrana plasmática, hemos encontrado que, al menos en nuestras células, el mevalonato también regula la expresión de Ras, dado que tanto el mRNA de ras como los niveles de proteína se inhiben en función la dosis de mevalonato. El colesterol también disminuyó de forma paralela los niveles de Ras, y los de su mensajerjo de forma dependiente del tiempo. La adición de mevalonato no modificó el fecto del colesterol, aunque lo adelantó en el tiempo, lo que parece indicar que el colesterol actúa por un mecanismo similar al mevalonato, gracias a su capacidad de modificar la cantidad y el metabolismo del mismo. Nuestros datos parecen indicar que la expresión de Ras se inhibe por la acumulación de algún derivado no esteroideo del mevalonato. En primer lugar, la expresión de Ras disminuyó tanto si se aumenta la síntesis endógena de mevalonato (células en presencia de LPDS) como si se aumenta la proporción de mevalonato que acumula productos no esteroideos (adición de colesterol y 25-hidroxicolesterol).