Eficacia diagnóstica y valor pronóstico de la procalcitonina en el diagnóstico de pacientes con sospecha de sepsis

Resumen

Estudios anteriores en células mesangiales (CM) humanas sugieron que el ácido todo-trans retinoico (ATRA)incrementaba la expresión de la ciclooxigenasa-2 (COX-2) y la producción de prostaglandina E2 (PGE2), una prostaglandina con efecto anti-inflamatorio en CM. El tema principal de este trabajo es 1) estudiar el mecanismo que envuelve la sobre- expresión de COX-2 por ATRA en células mesangiales renales y en células de neuroblastoma y 2) analizar el efecto en la nocicepción de la inducción de COX-2 por ATRA en la médula espinal. La primera parte de este trabajo es confirmar que ATRA incrementa la expresión de CIX-2 en células mesangiales humanas y de rata (CMH y SM43, respectivamente) examinar el mecanismo involucrado en dicho efecto. Cultivos de CMH fueron tratados con ATRA produciéndose un aumento en la expresión de COX-1 y COX-2, así como de la PGE2. COX-2 juega un papel muy importante la producción de OGE2 ya que el tratamiento con SC-560, un inhibidor de COX-1, inhibe parcialmente su producción, La sobre ¿expresión de COX-2 por ATRA es debida a mecanismo post- transcripcionales ya que al pre-incubar con actinomicina D se inhibe el incremento del ARN mensajero de COX-2 y la actividad sobre el promotor, mientras que no se encontraron mecanismos post- transcripcionales. Los receptores de ácido retinoico (RAR) no intervienen en la inducción de COX-2 por ATRA, su efecto no es inhibido por panantagonistas RAR, además el agonista RAR (TTNPB) no induce COX-2. Por lo que quizás ATRA podría actuar mediante la activación de ERK1/2 al ver que el inhibidor de MEK-1 PD098059, atenúa la inducción de COX-2 por ATRA. También se observó la fosoforilación de otras proteínas localizadas por debajo en la ruta de señalización al tratar con ATRA. Estos resultados ponen de manifiesto la existencia de una vía independiente de RAR en los efectos biológicos de ATRA en CMH. En células mesangiales de rata (SM43·), ATRA induce la isoenzimas COX y la producción de PGE2 de manera dependiente de ERK1/2. Sin embargo, hay notables diferencias con el mecanismo descrito en la inducción de COX-2 en CMH: 1)la producción de PGE2 aumenta levemente, 2) los RAR y RXR intervienen en la regulación de COX-2 por ATRA ya que los antagonistas RAR y RXR abolen la inducción del mensajero de COX-2, y el agonista RAR (TTNPB) o el agonista RXR (AGN194204)induce la expresión de COX-2 y 3) la fosforilación d ERK ¿ es importante para la inducción de COX-2 por ATRA. Por lo que en la regulación de COX por ATRA existen notables diferencias entre las células mesangiales humanas y de rata. En cuanto al sistema nervios, previamente observamos que la administración oral de ATRA induce hiperalgesia y alodinia similar a la observada en la sensibilización producida por inflamación. En este trabajo estudiamos los efectos de la administración de ATRA vía intratecal y su mecanismo de acción. La administración de ATRA en ratas normales aumenta las respuestas nociceptivas de manera dosis dependiente, tanto en la estimulación mecánica y en la estimulación térmica. La intensad de las respuestas es similar a la observada en los animales con inflamación con carragenina. Los efectos inducidos por ATRA son prevenidos por la administración previa del antagonista RAR y no por el antagonista RXR, lo que sugiere una acción selectiva en la medula espinal de los RARs. El inhibidor de COX, dexketoprofeno (DKT) y el antagonista de los receptores de la IL-1inhiben el efecto del ATRA. Estos resultados indican que COX y la IL-1 están involucrados en los efectos de ATRA en la médula espinal, similar a los observados en los animales con inflamación. En conclusión, ATRA ocasiona hiperalgesia y alodinia en rata vía COX dependiente. Estos efectos están mediados por RARs y asociados con el incremento de la expresión de COX-2 en la médula espinal. En el ultimo trabajo se estudio el mecanismo por el cual ATRA induce COX-2 en células de neuroblastoma humano (SH-SY5Y). ATRA induce la expresión de COX-2 e manera dosis y tiempo dependiente en células SH-SY5Y, mientras que la expresión de COX ¿1 no cambia la sobre-expresión de COX-2 va unida al aumento de producción de PGE2 y de un incremento del mensajero y la actividad del promotor de COX2. También se estudio la participación de los RARs y de las MAPK en este proceso. La pre- incubación con el antagonista RAR (LE540) y el inhibidor de ERK ¿ (PD98059) inhiben la inducción proteica de COX-2 y la actividad del promotor de COX-2, así como la producción de PGE2. Mientras que el antagonista de los RXR y los inhibidores de p38 (SB203580) y de JNK (SP600125) no tiene efecto. El incremento de la proteína RAR-b y de la fosforilación de ERK1/2 por ATRA sugieren por los RARs y ERK ¿ son activadas por ATRA en células de neuroblastoma humanas. Estos resultados ponen de manifiesto la dependencia de RAR y de las quinasas en el mecanismo por el cual ATRA induce la expresión y la actividad de COX-2 en células de neuroblatoma humano SH-SY5Y.