Cultivo y siembra de celulas endoteliales en protesis vasculares artificiales. Estudio experimental"

Resumo

Se ha llevado a cabo un estudio que pretende establecer la posibilidad de llevar a cabo un protocolo uniforme para la siembra de celulas endoteliales (ce) sobre protesis vasculares y mejorar el mantenimiento de dichas ce "in vitro" como paso previo al implante "in vivo". Se han realizado estudios de cultivos de ce, valorando su comportamiento morfologico y actividad biologica durante los diferentes subcultivos, estableciendo que el momento optimo para realizar la siembra es el 1er subcultivo. Se han realizado estudios de adhesion celular con la utilizacion de fibronectina y timidina marcadas isotopicamente. Se muestra que la fibronectina a dosis de 20ug/ml mejora la adhesion de las ce sobre el biomaterial (eptfe). La porosidad del biomaterial influye en la estabilidad de la monocapa confluente, siendo mejor para su utilizacion como substrato de siembra el eptfe de 30um. Se creo un substrato natural formado por una monocapa de fibroblastos fijada posteriormente con etanol, sobre la cual se realiza la siembra de ce con la finalidad de mejorar la adherencia de las citadas celulas. Dicho substrato permitio el mantenimiento de la monocapa de ce durante un largo periodo de tiempo "in vitro". De nuestros resultados podemos diseñar un protocolo que consiste en: -obtencion de las ce a partir del 1er subcultivo. -creacion de un substrato natural utilizando fibroplastos fijados al biomaterial con etanol. -siembra de las ce sobre el eptfe recubierto por el substrato natural y fibronectina a una concentracion de 20 ug/ml.