Purificacion e inmunoanalisis de glicoforinas en celulas eritrocitarias de rata

Resumen

Las glicoforinas son las sialoglicoproteinas mayoritarias de la membrana del eritrocito. Estas participan en procesos de interaccion de la celula con agentes externos y con otras celulas, en el mantenimiento de la forma celular y en la identidad antigenica del eritrocito. Se ha descrito la asociacion especifica de estas glicoproteinas con la linea celular eritroidea, asi como su posible funcionalidad en relacion con el proceso de diferenciacion celular. En este trabajo se realiza una aproximacion al estudio de las glicoforinas en celulas de la serie eritroidea en la rata. Para ello, en primer lugar se establecen condiciones adecuadas para su aislamiento a partir de membranas de eritrocito, realizando una caracterizacion parcial de las glicoforinas purificadas. Empleando estas se preparan anticuerpos especificos, observando la presencia de reactividad inmunologica cruzada entre las distintas glicoforinas obtenidas, asi como parcialmente con glicoforinas de eritrocito humano. Utilizando estos anticuerpos, se pone a punto un inmunoensayo que permite el analisis y cuantificacion de glicoforinas en celulas eritroideas de rata. Se obtiene con este metodo una valoracion que indica la presencia en reticulocitos de cantidades de glicoforinas ligeramente superiores a eritrocitos, con cifras de 59 y 34 ng de glicoforinas por millon de celulas, respectivamente. Por ultimo, se prepara un metodo de fraccionamiento de poblaciones celulares mediante afinidad por la lectina de germen de trigo. El fraccionamiento obtenido resulta relacionado con la edad de los eritrocitos y el grado de maduracion de los reticulocitos, e indica asimismo la presencia en reticulocitos de un mayor numero de grupos relacionados con glicoforinas.