Infección seminal e intraespermática por Chlamydia Trachomatis en hombres subfértiles comprobación por inmunofluorescencia directa en cortes semifinos del centrifugado seminal

Resumen

En la presente tesis se describen los antecedentes asociados al diagnóstico microbiológico de Infección Genitourinaria (IGU) por Chlamydia trachomatis y Mycoplasma sp., en 80 casos de pacientes sub-fértiles que fueron seleccionados para este estudio. La presencia de alteraciones seminales previas que la mayoría de ellos presentaba (79,3%), habían sido consideradas como de etiología desconocida ante la ausencia de signos ó síntomas característicos de algún padecimiento en la mayoría de ellos (71,2%). En cambio, un porcentaje alto de las cónyuges de estos pacientes (90%), presentaban asociados al diagnóstico de IGU Chlamydia trachomatis y Mycoplasma sp., signos y síntomas de infección con tratamientos previos inespecíficos (74,4%), además de antecedentes de pérdidas gestacionales tempranas (28 pacientes y 37 abortos) y de obstrucción tubaria (17 casos). Las parejas habían sido tratadas sin éxito por inseminaciones intrauterinas (233) y procedimientos de FIV e ICSI (9 procedimientos) de forma infructuosa. Asociados a la IGU se encontró, en los pacientes incluidos en este estudio, elevación del pH, alteración del volumen y de la viscosidad y color amarillento. Aunque la mayoría de estos cambios no fueron estadísticamente significativos en la comparación de pacientes entre sí y con el grupo control, la elevación del pH seminal se asoció a la IGU por Chlamydia y Mycoplasma significativamente (p=0,002; Fisher). Los datos obtenidos de la presente tesis, aportan evidencia del deterioro de los patrones de desplazamiento curvilíneo y rectilíneo principalmente y para la suma de estos valores en los casos de pacientes con IGU, por Chlamydia trachomatis y Mycoplasma sp. que resultaron estadísticamente significativos, cuando se compararon con el grupo control y que pudiéramos relacionar directamente con la infección de espermatozoides: al haber observado en un porcentaje elevado de casos, la presencia de bacterias de morfología compatible con dichos gérmenes, que se encontraron adosados al flagelo y dentro del citoplasma de la pieza media del mismo. Se registró una diferencia estadísticamente significativa en la concentración, morfología y vitalidad espermática entre el grupo de pacientes y el grupo control, pero las diferencias entre grupos de pacientes de acuerdo al diagnóstico microbiológico no fueron significativas. Se confirmó el patrón de teratozoospermia asociado a proceso infeccioso de la vía seminífera caracterizado por la presencia de espermatozoide de núcleo vacuolado y decondensado, con pieza media engrosada y doblada, enrollamiento y engrosamiento del flagelo. Mediante la técnica IFD (inmunofluorescencia directa) con anticuerpos monoclonales contra la MOMP de Chlamydia trachomatis, aplicada in situ al corte semifino desplastificado, se confirmaron el 58,75 % de los casos en los que se visualizaron partículas bacterianas compatibles con la especie Chlamydia trachomatis. Sin embargo, un número grande de partículas de morfología similar no presentó positividad a la reacción de inmunofluorescencia. La comparación de los resultados de ambas técnicas estableció una sensibilidad de 96,97% para el diagnóstico de Chlamydia trachomatis en el corte semifino teñido con azul de toluidina y una especificidad de 37,80%, con un valor predictivo positivo de 28,83% y un valor predictivo negativo de 97,96%. La poca especificidad del diagnóstico basado en la morfología de la Chlamydia por análisis en el corte semifino pudiera deberse a varios factores como el grosor del corte o el daño de la membrana plasmática bacteriana en la desplastificación y la presencia de gérmenes de morfología similar, como es el caso de la especie Mycoplasma con la que la Chlamydia trachomatis se encuentra frecuentemente asociada. El examen que realizamos en cortes semifinos del centrifugado seminal, a pesar de sus limitaciones en cuanto a la especificidad diagnóstica, en el caso particular de las IGU de varones subfértiles, proporcionó información importante acerca del proceso de infección seminal. Así, en el grupo de pacientes infértiles, a diferencia del grupo control, la presencia de bacterias de morfología compatible con las especies Chlamydia y Mycoplasma coexistió con cambios característicos de proceso inflamatorio, esfacelo de células epiteliales, presencia de leucocitos y macrófagos con actividad fagocítica contra bacterias y espermatozoides dañados e infectados, autolisis y restos celulares. Con la presente tesis hemos aportado evidencias morfológicas que han contribuido a definir la importancia y los mecanismos de las IGU por Chlamydia trachomatis y Mycoplasma sp. como gérmenes asociados, cuya participación en secuelas cicatriciales invalidantes para la función reproductora siguen siendo confusas por la dificultad diagnóstica de éstos gérmenes y la poca sintomatología que causan en el varón. Estudios de co-localización que incluyan marcaje molecular contra las especies más comunes de Mycoplasma, incluyendo el Mycoplasma genitalium, que en este trabajo no se consideró, permitirán concluir más precisamente la utilidad del corte semifino en el diagnóstico de infecciones seminales oculta y mecanismos de patogenicidad implicados.