El inhibidor de tripsina de cebada CMecaracterización molecular y regulación de la expresión por el locus LYS 3a

Resumo

Se han aislado dos clones cDNA para la proteína CMe. Ambos corresponden a un mRNA capaz de codificar para una proteína de secuencia idéntica a la previamente descrita para CMe, salvo por la presencia de tres aminoácidos adicionales en el extremo C-terminal y precedida por un péptido líder de 24 aminoácidos. En el mutante RISO, 1508 hay un acusado descenso en los niveles del mRNA para CMe con respecto a los que hay en la cebada parental salvaje Bomi. Dicho descenso no es resultado de una alteración sufrida por el gen de CMe, sino consecuencia de un efecto en trans del locus lys 3, situado en el cromosoma 5H, sobre el gen de CMe, situado en el 3H. Se ha aislado un clon genómico para CMe en el que aparece una región codificante, sin intrones e idéntica a la del cDNA, precedida por un promotor en el que no se observan significativas similitudes de secuencia con los de los otros genes afectados por el locus lys 3. En las 2 kb que se han secuenciado por delante de la región promotora aparecen dos elementos que se repiten en otras partes del genoma de cebada: una secuencia de 660 pb que se presenta en dos copias en tándem, y otra de unas 300 pb con un 81 por ciento de parecido a parte del UR del retrotransmisor de trigo WIS-2. A pesar de la presencia de estos elementos en la proximidad del promotor, no parece probable que nos encontremos frente a un pseudogén para CMe. A unas 2 kb del extremo 3, de la región codificante antes descrita, hay una zona que híbrida con el cDNA de CMe, aunque más débilmente, y que podría contener una variante de CMe.